Miranda Vergara, María Cristina - Capítulo 1. Índice - Análisis de las propiedades de transporte de una mutante del transportador AtCAX1 expresado en levadura Reportar como inadecuado




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Miranda Vergara, María Cristina - Capítulo 1. Índice - Análisis de las propiedades de transporte de una mutante del transportador AtCAX1 expresado en levadura -- Licenciatura en Biología. - Departamento de Química y Biología. - Escuela de Ciencias, - Universidad de las Américas Puebla.


Introducción



1.
ÍNDICE 1.
ÍNDICE ii ÍNDICE DE TABLAS iv 2.
RESUMEN 1 3.
INTRODUCCIÓN 3 31.
Contaminación por metales pesados, el caso de México 3 3.2 Riesgos por el contacto con metales pesados 5 3.3 Métodos utilizados para la remoción de metales pesados 6 3.4 Bioremediación 8 3.5 Papel de la vacuola en la acumulación de metales 11 3.6 La familia de intercambiadores catión-H+ CAX 14 3.7 La levadura como un sistema modelo para expresar heterólogamente proteínas de transporte de plantas 18 4.
OBJETIVOS 20 4.1 Objetivo general 20 4.2 Objetivos específicos 20 5.
MATERIALES Y MÉTODOS 21 5.1 Cepas de levadura, Vectores y Manipulaciones al DNA 21 5.2 Ensayo de crecimiento que demuestra la tolerancia de las cepas de levadura a calcio y metales pesados 21 5.3 Aislamiento de las vesículas de levadura ricas en membrana vacuolar 22 5.4 Determinación de proteína 25 ii 5.5 Ensayos de transporte 25 5.6 Cálculo de la cinética del transporte de metales 27 6.
RESULTADOS 28 6.1 Crecimiento de cepas de levadura en medio selectivo 28 6.2 Crecimiento de cepas de levadura en calcio y metales pesados 29 6.3 Purificación de las vesículas vacuolares de levadura usando el método de ficoll o de sacarosa 31 6.4 Actividad del transporte de metales en las cepas de levadura 32 6.5 Cinética del transporte de metales dependiente del gradiente de protones 34 7.
DISCUSIÓN 38 8.
CONCLUSIONES 44 9.
REFEERNCIAS 45 10.
APÉNDICE 50 iii ÍNIDCE DE TABLAS Tabla 6.1 Actividad del transporte de de H+ por la V-ATPasa en vesículas de vacuola de levadura aisladas con los gradientes de densidad de sacarosa o de ficoll 32 Tabla 7.1 Distribución de electrones en el último subnivel de energía 41 iv ...






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